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Hamilton 離子排斥色譜柱在使用前要進(jìn)行活化操作

更新時(shí)間:2022-07-14

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  離子色譜柱是離子色譜系統(tǒng)的心臟,只有性能優(yōu)良的色譜柱才能達(dá)到良好的分離效果,這對(duì)色譜柱材料,填充料(交換樹脂)、柱尺寸、裝柱技術(shù)等均有一定的要求。柱兩端均有微孔篩板以防試料或洗脫液中的細(xì)微顆粒進(jìn)入柱中,影響柱中樹脂的滲透性。
 
  Hamilton 離子排斥色譜柱的活化操作,以常見的C18反相分析柱為例,出廠時(shí)一般都封裝有甲醇或乙腈等有機(jī)溶劑。隨著時(shí)間的推移,色譜柱內(nèi)的有機(jī)溶劑緩慢揮發(fā),色譜柱內(nèi)可能出現(xiàn)氣泡。因此,新購(gòu)買的色譜柱在使用前一般都要進(jìn)行活化操作。
 
  下面以常見的4.6mmX150mm,5μm粒徑的C18反相分析柱為例:
 
  1.在活化色譜柱前,應(yīng)先用相關(guān)試劑沖洗液相系統(tǒng)的流路,確保無(wú)污染物殘留。切換至封柱試劑(一般為甲醇或乙腈),置換流路內(nèi)的試劑。
 
  2.停泵,將分析柱的進(jìn)液口連上系統(tǒng),移除出液口的堵頭,出液口不連上系統(tǒng)。傾斜放置色譜柱,使其出液口高于入液口。
 
  3.以0.1ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱約5分鐘,切換至0.2ml/min的流速繼續(xù)沖洗。觀察色譜柱出液口,若連續(xù)出液,停泵,將色譜柱出液口接入液相系統(tǒng)。
 
  4.以0.1ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱,5分鐘內(nèi)將流速平穩(wěn)提升至0.5ml/min繼續(xù)沖洗色譜柱。
 
  5.以0.5ml/min的流速?zèng)_洗色譜柱,期間觀察壓力與基線是否平穩(wěn),直到?jīng)_洗的總流量達(dá)到30個(gè)柱體積。
 
  6.活化完成:對(duì)于久置不用的類似型號(hào)色譜柱,再次使用前也可參考上述步驟進(jìn)行活化。
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